近期下厂，遇到了荧光分光光度计，由于该类仪器在苏州很少有厂家使用，这让我有了次难得的近距离实践机会，为此我再次学习了JJG537-2006《荧光分光光度计检定规程》以及荧光分光光度计的相关信息。
荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定, 不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化, 从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm，发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品（如凝胶条）的光谱扫描。
荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点，可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。
荧光分光光度计的工作原理：物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态, 这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出，从而产生荧光。不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征，这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱，因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。在溶液中，当荧光物质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即F=kc,利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析,与紫外-可见分光光度法类似，荧光分析通常也采用标准曲线法进行。
以上均为我收集到的书面信息，而通过现场学习，我有以下几点收获。
一、我了解到荧光分光光度计有两个单色器，即激发单色器系统及发射单色器系统。在规程中，根据仪器所使用的单色器种类不同，分为A类（色散型单色器）、B类（滤光片单色器），两类仪器的技术指标也有所不同。而现在的荧光分光光度计大多使用的是色散型单色器，更便捷，灵敏度也更高。所以均可参照A类仪器的校准方法及技术指标。
二、在校准氙灯亮线方法时，需要把无荧光的白色滤纸条放入样品室，但一定要注意，要佩戴一次性手套，因为手洗的再干净，也会使滤纸沾上荧光。
三、在校准萘峰位置方法时，我发现规程上所要求用的10-4萘-甲醇溶液浓度偏大，使响应值超出量程无法显示。因为我记得日立产的老款仪器可以做出响应值，测得萘峰，而这次的仪器为PE的新款仪器，灵敏度要比以前老仪器提高了几个等级。我准备下次再带10-7萘-甲醇溶液做确认测试。
由于荧光分光光度计在苏州比较少见，我们室还没有配全规程上规定的所有标准溶液，再加上自身对该仪器的认识有待提高，项目还做不全，因此仅有以上几点拙见，我将继续学习，努力提高自身专业技术水平，为理化室和计量所的事业添砖加瓦！
理化检测室 曹柳娜
2009年12月31日
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